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ㆍ제  목 국내산 프로폴리스의 생리활성물질에 관하여
ㆍ글쓴이 관리자 ㆍ등록일 2005년 10월 15일 ㆍ첨부 download ㆍHit 3005
동아대학교 식품과학부
교수 방 극 승

서 론
Propolis는 양봉 생산물의 하나로서 꿀벌이 외부침입물에 대한 보호 수단으로 식물의 수지를 원료로 하여 생산하는 물질로서 오랜 기간 제한적이나마 양봉업자 사이에서 민간요법으로 사용 되여 왔으며 근래 항산화제와 항생제의 능력이 있는 새로운 천연물질의 하나로서 주목받고 있다. 근래 새로운 기능성 천연물질의 수요는 날로 증가하고 있으며 상당한 량의 Propolis가 다양한 제품의 형태로 중국과 브라질에서 수입 되여 국내 유통되고 있다.
Propolis는 생산된 지역에 따라 약 200개 정도의 다양한 물질을 함유하고 있는 것으로 알려져오고 있으며 위와 같은 이유는 생산된 지역에 따라 구성이 일치하지 않기 때문으로 알려져오고 있다.
위와 같은 다양한 구성성분 중 phenoilc acid와 flavonoids가 생리활성이 있는 가장 중요한 물질로서 주목되고 있다.
Thin-layer chromatography(박층크로마티그라프)는 phenoilc acid와 flavonoids의 확인과 정량을 가장 쉽고 빠르게 할 수 있는 방법으로서 응용되고 있다.
따라서 본 연구는 한국에서 생산되는 Propolis의 특성을 규명함과 동시에 생산된 지역적인 차이가 있는지 확인하고자 실시하였다.

재료 및 방법
1. 본교 시료의 수집
Propolis는 양봉농가로부터 벌통 내부 보온 덮게 밑에 방충망으로 사용하는 청색 방충망(nylon net, 1x1 mm)을 2000년 4월 중 설치하여 10월 수집하였다. 본교가 부착된 방충망은 냉동실에 24 시간 방치 후 부착된 본교를 분리한 후 냉동 보관하였다.
Propolis의 추출은 본교 10 g에 80% ethanol를 40 el를 가하여(20% w/v)로 3일간 실온에서 교빈 한 후 여과지(Whitman No. 4)로 여과한 것을 사용하였다. Ethanol 추출 Propolis를 저온(60。C) 농축한 후 동결건조기로 건조하여 시료로 사용하였다.
총 phenolics함량은 garlic acid를 standard로 Flin-Coachlet을 사용하여 발색한 후 760 am에서 비색정량하였으며 flavonoid는 quercetin를 표준물질로 10% AlNO3로 발색한 후 410 nm에서 비색정량하였다.

결과 및 고찰
국내에서 수집한 조봉교(粗蜂膠)의 wax 함량과 에탄올 추출물에 의한 Propolis 추출률은
다음의 표와 같이 wax 함량은 평균 28.8(±8.1)% 이었으며 추출률은 36(±10.1)%이었다.
Wax 함량과 에탄올 추출률과는 역의 상관관계가 있는 것을 확인할 수있었다.
Wax의 함량이 식생의 차이 즉 지역적인 차이인지 아니면 벌꿀의 특성에 따라서 차이가 있었는지 확인할 수는 없지만 wax의 함량이 많으면 Propolis 의 추출률은 감소하였던 바 보다 많은 량의 프로폴리스를 추출하기 위하여 반드시 wax가 적게 함유되도록 노력하여야 할 것이다.

Table 1. Physicochemical properties of Propolis collected in Korea.


Fig.1.Relationship between wax content and yield of ethanol extract Propolis collected in Korea.

다음의 그림(Fig. 1)에서와 같이 국내에서 수집한 프로폴리스의 실리카겔을 이용한 박층그로마티그라푸에서는 6개의 후라보노이드와 3종의 페놀산을 포함한 10개의 띠를 확인할 수있었다. 후라보노이드로서는 퀘르세틴(quercetin)이 가장 많고 또 모든 시료에서도 확인 할 수있었으며 페놀산 중에는 카페인산(caffeic acid)이 가장 많았다. 9개의 시료 중 단 한 종(8번 시료)에서 루틴(rutin)을 확인 할 수있었다.


Fig.2.TLC pattern of ethanol extract Propolis collected in Korea. Orange-yellow flavonoids and blue fluorescent phenoilcs(white arrow head).
미세균억제능력을 확인하기 위하여 시리카겔상의 분리된 프로폴리스에 포도상구균을 배양하여 억제능력을 실험하여 보았던 바 국내에서 수집한 프로폴리스에는 총 6개의 억제 따를 확인 할 수있었다. 그러나 9개의 시료 중 어느 하나도 위와 같은 6개의 띠를 전부 갖고 있는 시료는 없었으며 유사한 형태로 분리된 시료라도 포도상구균에 대한 억제 띠는 아주 상이하였다. 위와 같이 같은 형태로 분리된 띠에서 사뭇 다른 세균에 대한 억제 띠를 확인하는 것이 본 연구가 처음이라고 생각되며 위와 같은 현상은 비슷한 시료라도 구성성분에 차이가 있거나 아니면 구성성분 중 상호 보완작용을 하는 물질이 존재하기 때문이 아닌가 사료된다.


Fig.3.Bioautography of ethanol extract Propolis collected in Korea against Staphylococcus aureus.

세균에 대한 억제능력은 지역적으로 차이가 있을 것으로 알려져 오고있지만 비슷한 형태의 띠를 보이는 것에서도 세균에 대한 억제능력은 사뭇 다르다는 것을 확인할 수있었다.
세균에 대한 억제능력 실험과 같은 방법으로 실리카겔 위에 분리된 프로폴리스의 항산화능력을 DPPH를 사용하여 측정하여 보았던 바 4개의 항산화능력이 있는 띠를 확인할 수 있었다. 특히 총페놀물질함량이 가장 많았던 1번 시료(423mg/g)에서는 강력한 항산화 띠를 확인할 수있었다(Fig 5). 반면 총페놀물질을 가장 적게 함유한 3번 시료(59 mg/g)에서는 항산화능력이 있는 띠를 확인할 수는 없었다.


Fig.4.Antioxidant activity of ethanol extract Propolis spotted on the silica gel. Note white degradation spot(arrow head) against dark DPPH background.

위와 같은 결과는 총 후라보노이드나 페놀의 함량보다는 구성 성분이 더 중요하며 국내에서 생산 수집한 프로폴리스도 강력한 세균억제능력과 항산화능력이 있다는 것을 확인할 수있었다.

참고문헌
Arujun H. B. et al. Cytotoxic, hepatoprotective and free radical scavenging
Effects of propolis from Brasil, Peru, the Netherlands and China.
J. Ethnopharmacology 2000, 72:239-246
Isaebel Martoes et al. Flavonoid composition of Tunisian honey and propolis.
J. Agr. Food Chem. 1997, 45:2824-2829.
Nieva Moreno M. I. et al. Screening of antibacterial activity of Amaicha
del Valle propolis. J. Ethnopharmacology 1999, 68:97-102.

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